常聽到一些新手同學養(yǎng)細胞，自己總是經(jīng)歷失望-絕望-希望的過程，現(xiàn)在為了方便一些新手同學養(yǎng)好細胞。把幾點注意問題跟大家分享一下，希望能夠對新手們稍有幫助：

1. 細胞不要過度消化，有些貼壁不牢的如293T，加入胰酶在臺子里晃晃就可以了，不用放到溫箱中；

2. 傳代時，細胞分的稀了或者分的不均勻，形成單細胞的克隆群，細胞就會長成密密麻麻的一群，如293T會成為小方塊狀，而不是正常的不規(guī)則形狀，這時候，即使沒有長滿盤，也應該消化重新鋪板。

3. 貼壁細胞的上清看起來清亮、顏色正常時，即使在鏡下檢測有些懸浮物，一般不是污染而是死細胞，尤其是復蘇的細胞，由于有死細胞，會有很多懸浮物。（以前很多同學看到有懸浮物就以為污染了，還倒掉了好不容易借來復蘇的一盤細胞）。污染了會看到明顯的懸濁液。

4. 不能讓培養(yǎng)基變色，稍微變黃就應該傳代，如果沒有長滿，可以換液，但是如果變黃了，細胞就會皺縮，或者死亡，大批量的浮起來。這時候就別挽救了。

5. 關于污染，很多新手剛開始做的時候，無論怎么小心，還是會莫名其妙的污染。這個咱們說是人生必經(jīng)階段。到現(xiàn)在我也還是很贊同這個理論。所以，絕望后別放棄才會有希望！

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